今時我們來聊一聊 液相色譜的冷門檢測器 都有哪些!冷門,說明不能通用,因為他們對于分析某些類型的樣品有非常好的效果,但可惜的是,這些樣品的種類不多,或者應(yīng)用的行業(yè)十分局限,所以這類檢測器也就很難在茫茫應(yīng)用中大顯身手了,只有遇到正好相克的對手,才能輕松取勝。檢測器中的熒光檢測器,電導(dǎo)檢測器等等就屬于這類儀器。
RID,簡稱示差,這是液相檢測器中非常令人唏噓感慨的一個,本來它是非常早期商品化的液相色譜檢測器,可是現(xiàn)在淪落到只能偏居各類檢測器的一隅,滄海桑田的變化,令人感慨萬分。
由于這類檢測器是檢測經(jīng)過流通池的液體的折光率的變化而產(chǎn)生響應(yīng)的,所以具有很好的通用性,因為被分析物溶解在流動相中以后,一定會改變流動相的折光率,所以示差檢測器可以對所有能進行液相分析的樣品產(chǎn)生響應(yīng),在過去的年代,大家對分析的要求還很低,不要求靈敏度,不要求分析速度,在加上示差的這種通用性,讓他當之無愧的成為了風(fēng)靡一時的通用型檢測器。
不過,隨著技術(shù)進步,大家對分析的要求越來越高,速度,靈敏度上都有了更嚴格的要求,RID的弱點就日益凸顯出來了:靈敏度低,通常示差檢測器能分析的樣品濃度都是在幾個mg/mL以上的,這對于現(xiàn)在的分析要求來講,實在是差的太遠了;無法運行梯度方法,示差檢測器靠得是檢測流動相折射率的變化進行檢測,如果流動相自己的折射率都一直在變化,示差就無法正常工作,梯度方法由于其中不同流動相的比例在不停變化,折射率也在不停變化,這就讓示差檢測器無法正常工作了。
也是由于這個原因,示差檢測器在使用的時候,通常要平衡非常久,保證流動相均勻穩(wěn)定之后,才能開始分析。另外,一切會影響折射率的因素:溫度的變化,混合的均勻性,氣泡等等對于示差來講都是致命的。
再加上新檢測的不斷涌現(xiàn),示差曾經(jīng)的江湖大佬地位逐漸萎縮,不過,幸運的是,它還沒有*消亡,由于價格便宜,一些經(jīng)典的應(yīng)用分析大家還是會選擇示差,比如糖的分析(當然是在不追求靈敏度的情況下)。
熒光檢測器(FLD),它的經(jīng)歷遠遠沒有示差檢測器那么曲折復(fù)雜令人唏噓,因為,它天生就是被設(shè)計用來測定具有熒光響應(yīng)的化合物的。
我們可以看看熒光檢測器的優(yōu)勢:
專屬性:由于具有熒光響應(yīng)的物質(zhì)種類不多,所以,熒光檢測器的專屬性非常好,只對有熒光特性的物質(zhì)才產(chǎn)生響應(yīng),其他一概不管,大程度的減小了干擾。通常,多環(huán)芳烴這種含有超大共軛體系的化合物都是具有熒光響應(yīng)的物質(zhì)。
靈敏度:熒光檢測器的靈敏度非常高,很多情況下,其在靈敏度上的表現(xiàn)堪比質(zhì)譜檢測器,這是由于熒光檢測器是屬于發(fā)射光檢測器,不同于紫外這類吸收光型檢測器,由于不受到樣品溶液本身等因素的影響,即使有很微量的光發(fā)射出來,也可以很好的被檢測。
除了上面兩個大優(yōu)勢之外,熒光檢測器在線性,流動相兼容性(只要避免一些有熒光淬滅效應(yīng)的試劑就可以)以及采樣頻率上也都有不錯的表現(xiàn)。
熒光檢測器的雖然性能犀利,但是由于鉆了牛角尖,注定也只能做個檢測器中的小配角了:
主要的原因就在于,液相測定的應(yīng)用里有熒光響應(yīng)的東西,實在是太少了…連5%都占不到,算上大家為了利用熒光檢測器的優(yōu)勢將樣品衍生為有熒光響應(yīng)的物質(zhì),也大概勉強就能占到10%吧。
這類檢測器更加冷門了,只對能產(chǎn)生“電”特定的物質(zhì)才有響應(yīng),要不物質(zhì)本身具有氧化還原特性,要不就是它自己本身就是個離子,其實,要是細算下來,液相能分析的化合物中,有著兩類特性的東西也不算很少,至少,不比有熒光的化合物少,不過,絕大部分這些“電性”化合物都可以用紫外/可見檢測器來測定,再加上電性檢測器的價格也不算便宜,所以,大部分的化合物,大家還都是用紫外/可見檢測器來測定,只有一些個別的種類大家才會考慮使用這種檢測器。
至于優(yōu)勢,其實這類檢測器在靈敏度上的表現(xiàn)是很不錯的,線性也很不錯,但是在專屬性上,就要差一些了,其實我們剛才也說過,很多的東西(尤其在很多復(fù)雜的生物樣品中)是具有氧化還原特性的,所以他們會對這類檢測器造成一定干擾,使它在性能上打上一些折扣。
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